《表3 电转体系:CRISPR/Cas9系统介导GFP在兔H11位点的定点整合研究》

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《CRISPR/Cas9系统介导GFP在兔H11位点的定点整合研究》


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按照Lonza Nucleofector的操作说明,各取2×105~1×106个细胞,分别添加如表3的体系之后和100μL电转液混合。选择EH-100程序进行电转。电转结束,快速取出电转杯并静置10 min。把电转的细胞转入至温育的含有15%FBS培养基的6孔板中,并于37℃,5.0%CO2培养箱中培养,5~6 h后换液。转染24 h后,换最佳筛选浓度的嘌呤霉素培养液对细胞进行筛选。间隔2~3 d,换一次嘌呤霉素培养液,直至长出大而漂亮的克隆岛。