《表1 修饰度及初始酶活》

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《手性脯氨酸类离子液体化学修饰猪胰脂肪酶催化性能研究》


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(1) TNBS法。(2)pNPP法。

由表1可知,PPL经过修饰后,大多数修饰酶的酶活得到提高,说明手性氨基酸类离子液体可以作为修饰剂用于提高酶活。不管是作为阴离子还是阳离子,N-AC-pro的构型对修饰度和修饰酶的酶活均有影响,L构型比D构型对PPL有更高的修饰度和酶活提升,其中[N-AC-L-pro][Cl]修饰的PPL酶活提高至原酶的2.5倍,对赖氨酸的修饰度达到了26.6%;[BMIM][N-AC-D-pro]修饰后的酶活则略有降低,可能由于相对疏水性的丁基咪唑阳离子和与蛋白质中天然氨基酸构型相反的N-AC-D-pro作用的结果。与之前研究一致的是,酶的修饰度越高,酶活提升得越明显[21],这可能是因为离子液体共价嫁接到蛋白表面上,使得酶的整体构象柔性降低,酶蛋白本身具备更大的“刚性”,对PPL构象产生了一定的保护作用,从而提高了酶活[24]。