《表1 Lac酶活测试方法汇总》

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《木质素降解酶的酶活测试方法的评价与分析》

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酶活测试的底物类型是决定酶活测试所应用反应类型的关键性因素，因此本文主要根据各种木质素降解酶催化的底物类型进行分类。表1汇总了不同Lac酶活测试方法，其中ABTS法应用最广泛。从表1中可知，ABTS法常用的测试波长为420nm[消光系数ε420=36000L/（mol·cm）]左右。丁香醛连氮（syringaldazine，SGZ）作为底物时，可被氧化脱去羟基形成自由基，然后转化为粉红色的醌类化合物[30]，该方法的测试波长为525nm[ε525=65000L/（mol·cm）]。虽然SGZ是测定Lac酶活最常用的底物，但是由于最终产物醌不溶于水，所以此方法的应用受到限制[31]。2，6-二甲氧基苯酚（2，6-dimethoxyphenol，2，6-DMP）可以作为反应底物，其在Lac的作用下被氧化生成3，5，3′，5′-四甲氧基二苯基醌（3，5，3′，5′-tetramethoxydiphenoquinone，DPQ)[32]。虽然邻联甲苯胺（3，3′-二甲基-4，4′-二氨基联苯，3，3′-dimethylbiphenyl-4，4′-diamine）也可作为底物测定Lac酶活，但此方法的相关报道较少，此法在室温下进行反应时测试波长为600nm[ε600=6340L/（mol·cm）]。此外，愈创木酚（guaiacol）和儿茶酚（邻苯二酚，catechol）作为底物时，在Lac的作用下，可分别被氧化成醛和半醌自由基[33]，检测波长为可见光波长。