《表4 VP酶活测试方法汇总》

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《木质素降解酶的酶活测试方法的评价与分析》

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VP结合了Li P和Mn P的特性，能催化多种底物包括ABTS、2，6-DMP、锰离子和酚红等。根据测定多功能过氧化物酶酶活底物的不同进行分类，表4汇总了不同VP酶活测试方法。由表4可知，当采用Mn2+法测定VP活性时，检测波长为238nm，消光系数ε238=6500L/（mol·cm）[79]。通常ABTS法底物浓度为0.1～5mmol/L，在加入H2O2后，ABTS被催化转化生成ABTS自由基，在420nm或者436nm处测定ABTS自由基的吸光度随时间的变化，消光系数ε420=36000L/（mol·cm）[74]和ε436=29300L/（mol·cm）[76]。酚红法的底物浓度为0.1g/L （0.28mmol/L），检测波长610nm，消光系数ε610=22000L/(mol·cm）[78]，此法相关报道较少。在上述三种方法中，ABTS法的消光系数最大，灵敏度较高，酚红法次之，Mn2+法最小。此外，ABTS法生成的产物更加稳定，在一定程度上可减少测试误差。综上，ABTS法可作为测定VP酶活的合适方法。