《表3 Li P酶活测试方法汇总》

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《木质素降解酶的酶活测试方法的评价与分析》

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根据测定木质素过氧化物酶酶活底物的不同进行分类，表3汇总了测定Li P酶活最常见的2种方法：藜芦醇法和天青染料B法。藜芦醇（veratryl alcohol，VA）分子式为C9H12O3，是常见的木质素单体模型化合物。在Li P的催化作用下，VA被氧化为藜芦醛，溶液由无色变为天蓝色，其消光系数在310nm处最大[ε310=9300L/（mol·cm）][67-68]。天青染料B (azure B）在Li P的催化作用下被氧化为天青B自由基，溶液由深蓝色变为无色，在651nm处达到最大吸光度[66，69]。由表3可知，藜芦醇法测Li P酶活最少可在3min内测定，而天青B法最少需要20min。从反应动力学分析，Li P对藜芦醇有较小的Km和较高的Vmax，所以所需时间较短，降低了由于酶活性降低而影响准确率的可能性。然而，与310nm相比，木质素造纸废水、多酚和含醌样品中的干扰物质在651nm处的消光系数很小，因此对天青B法干扰较小。综上所述，当被测溶液中干扰物质较少或对检测效率要求较高时，藜芦醇法较适合，相反当干扰物质多且检测时间宽裕时可选用天青B法。