《表2 α-苯乙醇转酯化反应参数》

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《手性脯氨酸类离子液体化学修饰猪胰脂肪酶催化性能研究》

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通过α-苯乙醇的转酯化拆分反应，可研究PPL在修饰前后对映体选择性的变化。表2中数据表明，所有修饰酶的催化活性和对映体选择率均得到提高。经过[BMIM][N-AC-pro]修饰后的PPL的活性和对映体选择性提升明显，其中经过[BMIM][N-AC-L-pro]修饰后的PPL-2活性提升最为明显，同时对映体选择率E值提升至原酶的2.5倍。这可能是离子液体修饰剂中1-丁基3-甲基咪唑阳离子相比于N-乙酰-脯氨酸阳离子有更强的疏水作用，增强了有机相中底物与酶盖子侧链的疏水作用，稳定盖子的打开状态，有利于底物进入蛋白口袋空腔催化位点，从而造成催化活性更大程度上的提升[24]。与[BMIM][N-AC-pro]修饰类似，L型结构的[N-AC-L-pro][Cl]相比于D型结构[N-AC-D-pro][Cl]修饰的PPL也表现出略高的转酯化反应活性和对映体选择性。与之前催化活性表现一致的是，离子液体的构型对修饰酶的活性和转化率具有类似影响，N-乙酰-L-脯氨酸不管作为阴离子还是阳离子组成的离子液体修饰后的修饰酶水解酶活、转化率以及对映体选择率均高于同种组合下不同构型的含N-乙酰-D-脯氨酸的离子液体修饰酶。