《表2 单增李斯特菌毒力基因扩增的引物信息[5-9]》

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《上海市食源性单核细胞增生李斯特菌MLST分析及毒力基因分布》

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选择单增李斯特菌的10个毒力基因，分别为prfA（编码毒力调节因子转录活化因子）、plcA（编码磷脂酰肌醇磷脂酶PI-PLC）、hly（编码李斯特菌溶血素，LLO）、mpl（编码依赖锌金属蛋白酶）、actA（编码肌动蛋白聚集蛋白）、plcB（编码磷脂酰胆碱磷脂酶PC-PLC）、inlA（编码内化素A）、inlB（编码内化素B）、iap（编码细胞壁水解酶p60）和clpE（编码一种热激蛋白ATP依赖型蛋白酶）。毒力基因的PCR扩增体系:DNA模板2μL，上、下游引物各1μL，Premix Taq Mix 10μL，加无菌水至20μL。PCR反应程序:94℃预变性5 min；94℃30 s，55℃30 s，72℃1 min，30个循环；72℃延伸7 min；4℃保存。PCR反应结束后，产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳，电压140 V，时间30 min，用凝胶成像系统观察扩增结果。本研究使用的引物信息见表2。