《表3 单因素试验水平设计》

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《橡胶草及其近缘种ISSR反应体系及扩增程序的优化》

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对ISSR-PCR反应体系中dNTP浓度、模板DNA、Taq DNA聚合酶、引物4个影响因素分别设置10个浓度梯度进行初步条件摸索（表3），反应体系中除表中的因素外还有10×Buffer（含Mg2+）2.0μL，加双蒸水至20.0μL。预设的初步扩增程序为:94℃3 min，94℃30 s，退火30 s，72℃70 s，循环30次，72℃10 min，4℃保存（李喜凤等，2012；张盾等，2018）。采用2%琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物，电泳结束后在凝胶成像仪拍照观察。