《表2 本研究设计PCR引物》

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《普通聚合酶链式反应鉴定牛肉及其制品中的牛源性成分》

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通过比对分析，确定参考基因序列的GenBank登录号为:牛（KX575711.1），绵羊（AF010406.1）[14]，马（JF010406.1）、驴（JF718884.1）、兔（AJ001588）、猪（X56295.1）及禽类鸡（X52391.1）、鸭（EU755252.1）、鹅（AY427816.1）等。最终选择以牛的Cytb基因为靶基因，确定GenBank登录号为GU249568.1的序列为参考序列设计引物。采用Primer 5.0共设计了9对引物，结果如表2所示。将各组引物的预期序列与上述参考的非牛基因序列（绵羊、马、驴、兔、猪、鸡、鸭、鹅）进行比对，选取引物3’端与牛源序列高度匹配而同非牛源序列不互补的1对引物，如图1所示。结合后续实验结果，最终确定的引物及参考的真核生物18S rRNA引物（如表3）。