《表1 滚环扩增引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《基于磁性纳米富集DNA及滚环扩增技术检测PBMC内HBV cccDNA临床价值分析》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

*:碱基硫化

RCA:以HBV高度保守区域分别设计8条与HBV cccDNA正链、负链互补的引物（上海生工），序列见表1。RCA反应体系:10×Phi29DNA聚合酶Buffer 1μL、引物（R1-R81）4μL、DNA 4μL、ddH2O补足1μL，总体积:10μL，经95℃3min、50℃15s、30℃15s、20℃10min反应后，再向混合液加入Phi29DNA聚合酶1μL（10U/μL）、10×Phi29DNA聚合酶Buffer 1μL、引物（R1-R81）4μL、BSA 1μL（0.4 mg/mL）、4×dNTP混合物3μL，总体积:20μL，30℃水浴16h，65℃水浴10min，保留RCA产物。以RCA产物为模板，进行跨缺口引物介导的实时荧光定量PCR反应，引物Prime1:5′-GGG GCG CAC CTC TCT TTA-3′，Prime2:5′-AGG CAC AGC TTG GAG GC-3′，具体操作参照文献[7]。