《表1 引物序列：PI3K介导的Nrf2磷酸化激活在槲皮素抑制山岗橐吾碱肝细胞毒性中的作用》

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《PI3K介导的Nrf2磷酸化激活在槲皮素抑制山岗橐吾碱肝细胞毒性中的作用》

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在细胞中先加入LY（20μmol·L-1）预孵2 h后，加入Quer（50μmol·L-1）预孵15min后加入Cliv（50μmol·L-1），培养48 h，收集细胞，细胞总RNA用RNeasy mini kit试剂盒抽提，得到的RNA用PrimerScriptTMMaster Mix进行逆转录，合成cDNA。得到的cDNA用SYBR green premix试剂，StepOne Plus仪器进行Real-time PCR扩增，PCR扩增条件:95℃30 s，95℃5 s，60℃34 s，共40个循环，95℃15 s，60℃1 min，95℃15 s，退火温度60℃。扩增完成后，根据溶解曲线来确定每个扩增反应的准确性。以2-ΔΔCt表示mRNA相对表达量。引物序列由上海捷瑞生物工程有限公司合成，见表1。