《表1 基准回归结果:ZKSCAN3介导的自噬在急性镉暴露肝毒性中的作用》

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《ZKSCAN3介导的自噬在急性镉暴露肝毒性中的作用》


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以总RNA提取试剂RNAiso Plus(宝生物,日本)溶解小于100 mg的肝组织,按说明书步骤提取样本总RNA。取等量总RNA按反转录试剂盒Prime Script RT reagent Kit(宝生物,日本)说明书步骤将总RNA转录为c DNA以进行后续实验。使用荧光定量检测试剂SYBR Master Mix(宝生物,日本)及荧光定量PCR仪(CFX96,美国伯乐)进行基因实时定量荧光PCR实验,检测自噬成膜、发生、延伸等过程的基因Map1lc3b,控制自噬小体与溶酶体融合的基因Rab5a,溶酶体v-ATPase酶基因Atp6v0d1,溶酶体膜蛋白酶基因Lamp1和溶酶体水解酶基因Ctsb的表达。以β-actin为内参,以2-ΔΔCT方法计算mRNA表达量[13],参照对照组计算相关基因mRNA相对表达水平。特异性引物序列见表1。