《表4 引物序列:LncRNA CASC9高表达激活PI3K/AKT信号通路促进口腔鳞癌细胞增殖转移》

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《LncRNA CASC9高表达激活PI3K/AKT信号通路促进口腔鳞癌细胞增殖转移》


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所有组织和细胞的RNA根据RNAiso Plus(Takara,Japan)说明书提取,Nanodrop ND 2000(Thermo Scientific)测定提取的RNA在波长260 nm及280 nm处的光密度值,计算RNA浓度和纯度。按照Takara逆转录反应说明书合成cDNA。实时荧光定量PCR,用Oligo7.0软件设计、合成目的基因CASC9、PI3K、AKT和内参基因GAPDH的引物,引物序列见表4。反应条件均为:95℃预变性1.5 min,95℃变性10 s,60℃退火延伸30 s,扩增40个循环。60℃延伸时采集荧光信号使用,采用2-ΔΔCt计算各基因m RNA的表达。