《表1 引物序列：基于PI3K/AKT/GSK-3β信号通路的杜仲健骨方治疗骨质疏松症作用机制研究》

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《基于PI3K/AKT/GSK-3β信号通路的杜仲健骨方治疗骨质疏松症作用机制研究》

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从低温冰箱中（‐80℃）取出大鼠右下股骨组织100 mg，剪碎，液氮速冻后，反复研磨，按Trizol试剂盒方法提取总RNA，按DNA Eraser试剂盒操作定量后反转录成c DNA，加入引物进行DNA扩增。反应条件：95℃预变性1 min；95℃变性15 s，70℃退火20 s，72℃延伸1 min，循环40次。在循环反应后，按以下条件测溶解曲线。90℃20 s，50℃1 min，95℃20 s。在50℃升温至95℃过程中，每升高0.5℃采集1次荧光信号，β‐actin为内参，所用引物均委托中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。数据采用PCR相对扩增分析方法进行统计，每组重复3次。基因引物见表1。