《表1 引物序列:基于STAT3/NF-kB/IL-6通路研究加味黄芩汤治疗溃疡性结肠炎的作用机制》

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《基于STAT3/NF-kB/IL-6通路研究加味黄芩汤治疗溃疡性结肠炎的作用机制》


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以cNDA为模板进行RT-qPCR检测:每个PCR反应体系内容如下:2×Talent qPCR PreMix 12.5μL,上、下游引物各0.75μL,ddH2O 11μL。PCR反应条件:95℃预变性15 s,95℃变性10 s,60℃退火20 s,72℃延伸32 s,40个循环。PCR反应结束后进行熔解曲线分析以验证PCR扩增产物的特异性。反应结束获得IL-6、NF-κB和STAT3 mRNA的循环阈值(Ct),采用△△Ct(△△Ct=△Ct-△Ct基础值,△Ct=Ct目的基因-Ct内参)方法分析,根据2-△△Ct公式计算基因的相对表达量(表1)。