《表1 差异基因表达分析所用引物》

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《玉米C型细胞质雄性不育花药不同发育时期的转录组分析》

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分别以87-1“三系”材料的减数分裂前期Ⅰ、四分体期和单核期的花药总RNA为模板，反转录合成c DNA第一链。利用TB GreenTM Premix Ex TaqTMⅡ（Ta Ka Ra）荧光定量试剂盒在CFX96实时定量PCR仪上对转录组数据差异表达的基因Zm00001d043834、Zm00001d009222、Zm00001d007966和Zm00001d009727进行定量分析。使用Primer3 plus在线设计所有qRT-PCR反应特异引物（表1）。c DNA反转录和qRT-PCR反应体系及反应程序按照Prime ScriptTMRT reagent Kit with g DNA Eraser（Ta Ka Ra）和TB GreenTM Premix Ex TaqTMⅡ（Ta Ka Ra）试剂盒里的说明书的操作进行。每个试验均设3次生物学重复和3次技术重复，利用（2-ΔΔCt）法[33]分析基因表达水平。