《表2 浏阳金柑果实中类黄酮的鉴定》

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《基于转录组测序的金柑类黄酮糖基转移酶基因的初步分析》

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采用UPLC G2-S QTOF技术分析了浏阳金柑果实中类黄酮的种类，鉴定出了11种类黄酮，通过与标准品的保留时间、一级质谱、二级质谱比对，能够准确定性4种类黄酮，其他7种由于没有商业化的标准品，仅能参照前人的研究结果（Ogawa et al.，2001；Barreca et el.，2011；Lou et al.，2015）进行定性。图1和表2为花后31 d金柑果实类黄酮的基峰离子流（BPI）图和质谱数据，峰1和峰5分别代表维采宁–2（Apigenin-6，8-di-C-glucoside，Vicenin-2）和3，5–双碳–β–D–吡喃葡萄糖基根皮素（3′，5′-di-C-β-glucopyranosylphloretin），属于双碳糖苷类黄酮。这两种类黄酮的糖基化修饰主要由C–葡萄糖基转移酶（C-glucosyltransferase，C-UGT）催化完成。该酶催化UDP–葡萄糖（UDP-glucose）的葡萄糖基，以C-C键的形式连接到类黄酮苷元分子上（表3）。峰2、峰3、峰4、峰8和峰9分别代表木犀草素–8–C–新橙皮糖苷（Luteolin-8-C-neohesperidoside）、木犀草素–6–C–新橙皮糖苷（Luteolin-6-C-neohesperidoside）、芹菜素–8–C–新橙皮糖苷（Apigenin-8-C-neohesperidoside）、刺槐黄素–8–C–新橙皮糖苷（Margaritene或Acacetin-8-C-neohesperidoside）、刺槐黄素–6-C–新橙皮糖苷（Isomargaritene或Acacetin-6-C-neohesperidoside），属于单C糖苷类黄酮。这几种类黄酮的糖基化修饰需要两种UGT，首先由C-UGT将UDP–葡萄糖的葡萄糖基以C-C键的形式连接到类黄酮苷元分子上，而后由1，2–鼠李糖基转移酶（1，2-rhamnosyltransferase，1，2RhaT）将UDP–鼠李糖（UDP-rhamnose）的鼠李糖基团连接到葡萄糖基团上，形成新橙皮糖苷（表3）。峰6、峰7、峰10和峰11分别代表4个O–糖苷类黄酮，即野漆树苷（Rhoifolin或Apigenin7-O-neohesperidoside）、柚皮苷（Naringin或Naringenin-7-O-neohesperidoside）、金柑苷（Fortunellin或Acacetin7-O-neohesperidoside）、枸橘苷（Poncirin或Isosakuranetin7-O-neohesperidoside）。这几种类黄酮的糖基化修饰涉及两种UGT，首先由7–O–葡萄糖基转移酶（7-O-glucosyltransferase，7-O-UGT）将UDP–葡萄糖的葡萄糖基以O-C键的形式连接到类黄酮苷元分子7-OH位上，而后再由1，2RhaT催化UDP–鼠李糖（UDP-rhamnose）的鼠李糖基团连接到葡萄糖基团上，形成新橙皮糖苷。