《表1 H3WT和H3K14突变体真核表达载体构建时所需引物信息Tab 1 Primers used for construction of H3WT and mutant histone H3 re

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《组蛋白H3K14M突变对嗜肺军团菌来源甲基转移酶活性的抑制》

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注:（1）H3WT末端加入了HA-FLAG tag序列，故反向引物有3条。（2）H3K14突变体的正向引物由前端引物（F1）和后端引物（F2）组成；F1与H3WT的正向引物相同；F2中设计突变位点，分别为K14M-F2、K14I-F2、K14R-F2。反向引物与H3WT的反向引物相同。

空载质粒p CDH-CMV-MCS-EF1-cop GFP（简写为EV-GFP）购自中科院质粒库；H3野生型真核表达质粒p CDH-CMV-MCS-EF1-cop GFP-H3WT-HA-FLAG（简写为H3WT）和3个H3K14突变体表达质粒（pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-H3K14M-HA-FLAG、p CDH-CMV-MCS-EF1-cop GFP-H3K14I-HA-FLAG、p CDH-CMV-MCS-EF1-cop GFP-H3K14R-HA-FLAG，依次简写为H3K14M、H3K14I、H3K14R）由本课题组在空载质粒的基础上构建。载体构建所需引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。引物序列见表1。p CDH-CMV-MCS-EF1-puro（简写为EV-puro）及慢病毒包装辅助质粒ps PAX2和p MD2.G来自Addgene质粒库。Rom A表达质粒（p CDH-CMV-MCS-EF1-puro-Rom A，简写为Rom A）由生工生物工程（上海）股份有限公司构建。