《表1 本研究所有引物及序列》

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《黄曲霉转录因子AfMcrA的克隆及功能预测》

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根据黄曲霉Af Mcr A的cDNA序列（Accession No.XM＿002380888.1），设计并合成一对特异性引物McrAF和McrAR，如表1所示，PCR扩增Af Mcr A基因。其反应体系如下:2×A8 PCR Master Mix 12.5μL，cDNA 1μL，McrAF和McrAR（10μmol/L）各0.5μL，补加ddH2O至25μL。PCR程序为94℃、4 min；94℃、30 s，60℃、20 s，72℃、45 s，30个循环；72℃最后延伸10 min。纯化的PCR产物直接克隆到平末端克隆载体pTOPO-Blunt，转化Escherichia coli Trans10感受态细胞。将菌落PCR鉴定的5个阳性转化子送上海生工进行测序，测序引物为载体通用引物M13F和M13R。