《表2 研究中所用到的SYK蛋白序列信息》

《表2 研究中所用到的SYK蛋白序列信息》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《香鱼(Plecoglossus altivelis)脾脏酪氨酸激酶SYK的鉴定及其介导的MAPK信号通路研究》


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提取香鱼健康组织的RNA并反转录获得c DNA。从香鱼头肾单核/巨噬细胞(Monocyte/macrophage,MO/MΦ)的转录组数据获得Pa SYK序列。使用Primer 5.0软件设计特异性引物(SYK F1/R1,表1),以获得的c DNA为模板扩增其开放阅读框(ORF),然后进行克隆和测序。PCR反应体系如下:c DNA 1μL,上下游引物各1μL,d NTP(2.5mmol)3.5μL,10×La Buffer 2.5μL,La Taq 0.25μL,dd H2O 15.75μL。PCR程序如下:预变性94°C 2min;变性94°C 30s,退火56°C 30s,延伸72°C 2min,30个循环;延伸72°C10min。使用Bio Edit软件将克隆的SYK蛋白质序列与Gen Bank数据库进行比对。使用Prot Param在线分析其分子量和等电点。使用Clustal W软件对Pa SYK进行多重序列比对和同源性分析。使用MEGA 6.0软件以邻接法(NJ)制作分子系统进化树。本研究中使用的序列如表2所示。