《表1 金钱鱼Sox3基因克隆以及定量分析的引物》

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《金钱鱼Sox3基因cDNA克隆及组织表达》

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提取金钱鱼各组织RNA，各组织的总RNA均为1μg，遵循DNaseⅠ说明书步骤去除其基因组DNA，然后按照the Rever Tra Ace-a first-strand c DNA Synthesis Kit的说明书合成第1链c DNA模板，以β-actin为内参。反应体系25μL，反应条件：94℃4 min；94℃30 s，58℃30 s，72℃1 min，35个循环；72℃1 min。金钱鱼Sox3基因的特异引物反应体系为25μL，循环反应条件为：94℃4 min；94℃30 s，58℃30 s，72℃1 min，40个循环；72℃1 min。产物使用15 mg/m L的琼脂糖凝胶电泳进行检测，使用数码凝胶成像分析系统对电泳结果进行拍照并进行半定量分析。