《表1 q RT-PCR引物序列》

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《转化生长因子β1和α平滑肌肌动蛋白在肝内胆管癌血管形成中的作用》


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用Trizole试剂提取肝内胆管癌患者癌组织和远端正常肝组织的总m RNA。按照反转录试剂盒说明书操作反转录为c DNA,反转录条件:25℃10min,42℃50 min,85℃5 min。引物序列见表1。按照荧光定量PCR扩增试剂盒说明书操作,扩增条件设置:94℃预变性4 min,94℃变性30 s,60℃退火30 s,72℃延伸30 s,循环40次,72℃检测信号。使用2-ΔΔCt法来计算相对m RNA含量,ΔCt=Ct目的基因-CtGAPDH,ΔΔCt=ΔCt癌组织-ΔCt远端正常肝组织,2-ΔΔCt表示癌组织目的基因m RNA的相对含量较远端正常肝组织所改变的倍数。