《表1 vip基因鉴定的通用引物》

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《新型vip3Aa基因的克隆表达及活性分析》

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注：R=A或G；M=A或C；S=G或C；H=A、T或C；D=G、A或T；N=A、C、G或T。

参照REYES-RAM魱REZ等[13]的方法对Bt TB22-5菌株中质粒DNA进行提取。使用表1中vip通用引物对Bt TB22-5菌株的vip基因进行PCR鉴定。vip1-F和vip1-R、vip2-F和vip2-R引物序列及PCR反应条件参照HERN魣NDEZ-RODR魱QUEZ等[14]的方法；vip3-1F和vip3-1R、vip3-2F和vip3-2R引物序列及PCR反应条件参照FANG等[15]的方法。若鉴定vip3型基因的2对引物均能扩增出与其预测大小一致的产物，表明该扩增片段与vip3Aa1基因具有高度相似性；如果仅有1对引物扩增出与其预测大小一致的产物，则表明扩增片段是一个序列同源性较低的新型vip3基因[12，15]。扩增产物经电泳检测及凝胶回收后，送深圳华大基因科技有限公司进行测序。