《表1 转基因小鼠基因型鉴定引物》
2种转基因小鼠及其杂交后代的基因型鉴定使用αMHC-Cre和ChR2特异性引物(表1)对鼠尾DNA进行PCR扩增,根据产物电泳结果判断基因型。鼠尾DNA提取采用碱裂解法,取鼠尾(0.5~1 mm)于300μL50 mmol·L-1Na OH溶液中,100℃金属浴30 min,冷却后加入25μL 1 mol·L-1Tris-HCl (p H8.0)混匀,用作PCR模板。PCR体系(20μL):dd H2O7μL,引物各1μL,模板DNA 1μL,2×Es Taq Master Mix 10μL。PCR程序:95℃2 min;94℃20 s,63/57℃20 s,72℃20 s,35个循环;72℃1 min,10℃保存。PCR产物经2%琼脂糖凝胶电泳分离后成像分析。
图表编号 | XD00207607800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2021.01.28 |
作者 | 葛焰、王伟、刘洁玉、曾博 |
绘制单位 | 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室、西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室、西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室、西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室 |
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