《表1 抗病基因引物:辽宁省水稻品种抗稻瘟病基因型鉴定》

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《辽宁省水稻品种抗稻瘟病基因型鉴定》


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注:F.正向引物;R.反向引物。

参考文献引物[12-13]及优化反应体系和条件(表1),Primer1~9用于稻瘟病抗性基因的鉴定。每个水稻品种检测各类稻瘟病抗性基因设3次重复。PCR反应体系(25μL):2×Taq PCR Master Mix(康为世纪生物科技有限公司,CW0682M)12.5μL,正向引物和反向引物各1μL (10μg·m L-1),DNA模板1μL(20~80ng·m L-1),之后用dd H2O补足至25μL。PCR反应程序:94℃预变性5 min,94℃变性30~60s,54~60℃退火60s,具体依据引物的G/C含量来定,72℃延伸30~90s,具体依据目的片段长度而定,30个循环,72℃延伸5min。