《表1 基因型鉴定引物信息》

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《条件性胰岛β细胞CASK基因敲除小鼠的构建及鉴定》

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利用CASK基因和Cre基因的鼠特异性引物（表1）进行PCR反应。CASK基因PCR反应体系（20μL）:PCRmixTaq 10μL，上、下游引物各1μL（引物浓度为10μmol/L），模板DNA 2μL，加灭菌蒸馏水补足体积。反应条件为:94℃预变性3 min；94℃变性30 s，60℃退火35 s，72℃延伸35 s，38个循环；最后72℃延伸5 min，4℃保存备用。Cre基因PCR反应体系（20μL）:PCRmixTaq 10μL，Cre上、下游引物各1μL（引物浓度为10μmol/L）和模板DNA 2μL，加灭菌蒸馏水补足体积。反应条件为:95℃预变性5 min；95℃变性30 s，60℃退火30 s，72℃延伸40 s，35个循环；最后72℃延伸5 min，4℃保存备用。两种基因PCR反应终产物（10μL/孔）进行1%琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像系统分析结果。