《表1 3种蛋白酶相互作用的比较》

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《鳗鱼骨胶原肽钙螯合物的制备及其稳定性和Caco-2吸收特性》

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注：P.胃蛋白酶，T.胰蛋白酶，C.胰凝乳蛋白酶；+.同时水解两种酶；→.逐步水解（P→T代表第一个P，后跟T）。不同字母表示差异显著，P<0.05。

人体摄入食物中的蛋白质在胃液消化酶的作用下，初步水解，在小肠中完成整个消化吸收过程，而人体消化蛋白系统主要是由胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶作用在蛋白质的肽键上，分解为肽或氨基酸。表1为单酶处理和包含2种或3种酶的组合处理的比较。在三酶处理中，鱼骨粉与蒸馏水料液比1∶8(g/m L）、酶剂量8 000 U/g。双酶同时水解（同时添加胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶）中两种酶的添加比例为1∶1（酶活性比），双酶同时水解中2种酶的水解时间比例为1∶1（首先用胃蛋白酶水解底物，然后用胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶水解，或者3种酶同时进行水解），发现3种酶的协同作用显著改善了由单酶或双酶产生肽的钙结合能力，肽的最佳钙螯合率为35.78%。此外，3种酶协同作用后蛋白质的肽键逐渐断裂，分解成肽和氨基酸，导致水解物的水解度和肽产量显著提高（P<0.05）。研究最佳水解条件如下：鱼骨粉与蒸馏水料液比为1∶8(g/m L），酶剂量为24 000 U/g（胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶均为8 000 U/g），分别在37℃和不同p H值环境下放置4 h。