《表7 发酵乳样品qPCR检测结果(CFU/g)》

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《定量PCR技术检测杀菌型产品中乳酸菌》

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注:Not detected表示未检测到。

全部被检产品标签标示的菌株都符合法律法规要求[6，7]，无超范围标示。14批次产品都标示有德氏乳杆菌保加利亚亚种和嗜热链球菌，检测结果除F1产品中未检测到嗜热链球菌，其他产品含量都能够达到105 CFU/g（mL）以上，此类产品是基于以德氏乳杆菌保加利亚亚种和嗜热链球菌为主要的发酵剂，并且研究发现此2种菌在乳中共同培养时菌株数量比单独在培养时高，表明它们存在着协同作用[22]。有8批次产品中添加了嗜酸乳杆菌，其含量都能达到9.27×105～6.63×106 CFU/g（mL），具有加工和储藏的稳定性，使其能在乳制品中保持高含量，在发酵乳和含乳饮料中得到了广泛的应用原因。双歧杆菌是人体益生菌中重要的一大类乳酸菌，现逐渐的被行业用作发酵剂添加在益生菌产品中，但是在众多乳酸菌中作为唯一一类专性厌氧菌，其生产发酵过程中的条件相较其他乳酸菌更为苛刻，在实样的检测中有3批次（Y2、Y3、Y9）未检出产品中标示的双歧杆菌，在模拟样品中双歧杆菌扩增良好的情况下，不排除有多种因素影响其实样检测结果。在添加乳酸乳球菌的产品中除了F1未检出，Y8中乳酸乳球菌检测数量占据了总数量的13.8%，而其他产品都有0.1%～7%的比例；在当今发酵食品快速发展中乳酸乳球菌也逐渐成为最常用的发酵剂菌种之一，其优良发酵特性的具有重要生产意义[23]。有6批次产品中标示有干酪乳杆菌，由于在前期的实验中合成的干酪乳杆菌的引物和探针无法有效的扩增出目标乳酸菌，所以在后续实验中需要进一步研究合适的引物。综上所述，本文建立的qPCR方法可以用于杀菌型产品中的德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、乳酸乳球菌和双歧杆菌定性和定量检测，基本包含了杀菌型发酵乳和含乳饮料产品常用的乳酸菌种类。