《表3 TNF-α、IL-6实时荧光定量PCR特异引物》

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《两种岭南湿热证小鼠模型肠道菌群动态变化的研究》

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取50-100 mg结肠标本液氮研磨，加入Trizol、氯仿、异丙醇等提取RNA。按照逆转录试剂盒去除基因组DNA后，冰上配制20μl反转录反应体系，合成c DNA模板，存于-20℃冰箱备用。以GAPDH为内参进行PCR扩增，检测各组结肠组织中TNF-α、IL-6 m RNA的表达水平。具体反应程序同肠道菌群的PCR反应程序，扩增引物序列见表3。每个样品设置3个复孔，实验结果重复3次，以2-ΔΔCt法计算各目的基因的相对表达量。