《表1 实时荧光定量PCR特异引物序列》

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《大豆HMGR基因家族的鉴定与表达分析》

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利用Bio-Rad CFX96实时荧光定量PCR仪，采用TransStartTip Green qPCR SuperMix（全式金）试剂盒进行荧光定量PCR。根据GmHMGR1～GmHMGR8基因的序列差异，利用Primer Premier6软件设计每个基因的实时荧光定量PCR特异引物，CYP2基因为内参基因（表1）。反应体系:2×TransStartTip Green qPCR SuperMix 10μL，上下游引物各0.4μL（10μM），cDNA模板2μL，ddH2O补足至20μL。反应程序:94℃30s，94℃5s，58℃15s，72℃10s，45个循环。每个样品3次生物学重复，3次技术重复。采用2-ΔΔCT法计算基因的相对表达量，GraphPad prism 6.01软件进行数据分析及绘图。