《表1 CYC-B基因克隆及表达引物》

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《枇杷有色体特异番茄红素β-环化酶基因的克隆及表达分析》

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采用天根生化科技（北京）有限公司的多糖多酚植物总RNA提取试剂盒，具体操作按照使用手册进行，并电泳检测RNA质量。获得枇杷近缘植物的CYC-B基因完整CDS区的序列，并用Clastal X进行多序列比对，遵循引物设计原则，利用Primer 5.0设计一对简并引物（表1）。以‘川农1-5-9’和‘大五星’枇杷未转色期果实反转录产物为模板，进行PCR扩增，扩增产物经电泳检测后，对目的条带进行回收纯化（天根通用型DNA纯化回收试剂盒），再连接载体（成都擎科生物技术有限公司p Clone007 Blunt Vector Kit），热激法转化大肠杆菌TreliefTM5α，挑取阳性克隆，经菌液PCR、电泳检测后测序。