《表1 基因克隆及表达引物》

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《枇杷脂类相关质体蛋白基因PAP的克隆及表达分析》

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使用Trizol法提取枇杷样品的总RNA，其完整性通过1.5%琼脂糖凝胶电泳检测，纯度通过核酸蛋白仪测定A260/280及A260/230比值来鉴定。同时在NCBI上检索蔷薇科近缘植物（苹果，白梨，桃等）的PAP基因CDS区序列信息，比对后利用Primer 5.0设计一对简并引物（表1），以由‘川农1-5-9’和‘大五星’提取的RNA得到的反转录产物为模板，进行PCR扩增后经1.5%琼脂糖凝胶电泳检测后经：目的片段与载体连接、连接产物转化E.coli DH5α、转化子的筛选及鉴定获得克隆序列。