《表1 q RT-PCR引物核苷酸序列》

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《mTOR抑制剂雷帕霉素对癫痫后脑损伤保护机制研究》

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取分离的大脑皮层组织，加入Trizol裂解液和氯仿，经过分离、沉淀、干燥等步骤得到总RNA。按照Thermo Scientific c DNA合成试剂盒的说明，加入样本RNA、逆转录酶、上游引物和下游引物合成模板c DNA。按照q RT-PCR试剂盒的要求，加入c DNA、上游引物和下游引物在PCR仪上进行DNA扩增。q RT-PCR循环扩增条件如下：PI3K，变性：95℃，45 s；退火：58℃，45 s；延伸：72℃，1 min；30个循环；Akt，变性：95℃，45 s；退火：52℃，1 min；延伸：70℃，1 min；30个循环；m TOR，变性：95℃，45 s；退火：56℃，45 s；延伸：72℃，1 min；30个循环；GAPDH（内参），变性：95℃，30 s；退火：58℃，30 s；延伸：72℃，30 s；28个循环；DNA扩增结束后4℃冷却，分析数据。q RT-PCR引物见表1。