《表2 博落回p6H基因荧光定量表达分析所用引物》

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《博落回p6H基因的表达分析与基因结构分析》

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使用型号为Tiangen#DP432的试剂盒来提取博落回总RNA，RNA含量检测使用Qubit 2.0，之后用1%凝胶电泳进一步检测所提取RNA的完整性。获得完整的RNA后，使用宝生物（TaKaRa）PrimeScript TMⅡ1stStrand cDNA Synthesis Kit进行反转录合成c DNA。其荧光定量PCR引物（表2）根据博落回基因组中p6H基因序列设计，PCR扩增的模板使用反转录合成的cDNA，然后使用SYBR Green荧光染料法在ABI7300荧光定量PCR仪上进行实时荧光定量表达分析。反应条件的为:94℃30 s，94℃5 s，60℃30 s，一共40个循环，且3次重复处理。使用2-荭荭Ct方法计算数据，用Microsoft Excel软件分析输出结果，制图使用Graph Pad Prism 5软件。