《表1 Hasp68引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《条形柄锈菌吸器特异效应蛋白Hasp68抑制寄主免疫并与小麦组织蛋白酶B互作》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

利用Primer Premier 5.0设计引物（表1），利用Hasp68-p GR106-F/Hasp68-p GR106-R，以CYR31侵染小麦叶片的c DNA为模板，PCR扩增Hasp68基因ORF，扩增产物与p GR106载体使用Cla I和Sal I双酶切后连接，构建在烟草中瞬时表达的重组载体p GR106-Hasp68。利用引物Hasp68△SP-p EDV6-F/Hasp68△SP-p EDV6-R扩增编码Hasp68成熟蛋白序列（Hasp68△SP），通过BP酶构建到p DONR?221载体，阳性质粒p DONR?221-Hasp68△SP与p EDV6载体利用LR酶反应构建在小麦中瞬时表达效应蛋白的重组载体p EDV6-Hasp68△SP。利用引物Hasp68△SP-p GBKT7-F/Hasp68△SP-p GBKT7-R扩增编码Hasp68成熟蛋白序列，扩增产物与p GBKT7载体质粒使用Nde I和Eco RI双酶切后连接，构建用于酵母双杂交的重组载体p GBKT7-Hasp68△SP。利用引物Hasp68△SP-p SPYCE（M）-F/Hasp68△SP-p SPYCE（M）-R扩增Hasp68△SP，利用Bam HI和Xma I双酶切扩增片段和p SPYCE（M）载体连接构建用于在烟草中进行Bi FC的重组载体p SPYCE（M）-Hasp68△SP。