《表1 PCR引物信息：牛分枝杆菌PPE68与Mb1230以及PPE57和PE-PGRS35的表达纯化及其在牛结核病血清学诊断中的初步应用》

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《牛分枝杆菌PPE68与Mb1230以及PPE57和PE-PGRS35的表达纯化及其在牛结核病血清学诊断中的初步应用》

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根据GenBank公布的牛分枝杆菌AF2122-97菌株的ppe57、ppe68、mb1230和pe-pgrs35四个基因序列，分别设计引物（表1），扩增目的片段。将纯化获得的PCR产物ppe 57、ppe 68、mb1230和pepgrs3 5分别连接到表达载体pET-32a（+）、pProEX-HTB、p ET-22b（+）和pET-28a（+）中，并转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中，提取质粒进行PCR和双酶切鉴定，并对阳性质粒测序，将测序正确的重组质粒分别命名为pET32-ppe57、pPro-ppe68、pET22-mb1230和p ET28-pe-pgrs35。