《表1 PCR扩增引物:306株结核分枝杆菌耐药情况及菌型分析》

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《306株结核分枝杆菌耐药情况及菌型分析》


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取人型结核分枝杆菌耐药株的单菌落,加入到300μl DNA裂解液中,55℃水浴3h后经95℃灭活5min,采用酚-氯仿-异戊醇溶液抽提后加入50μl高压灭菌双蒸水溶解,20℃保存备用。PCR扩增体系:DNA Taq Mix 25μl,ddH2O 20μl,上、下游引物各1μl,DNA模板2μl,反应体系共50μl。反应参数设置为95℃5min;95℃40s,64℃40s,72℃1min,35个循环;72℃7min。PCR扩增产物纯化后测序,并进行DNA基因组序列分析(表1)。