《表1 PMT方案名称：马铃薯StNAC2基因的克隆及其在镉胁迫下的表达分析》

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《马铃薯StNAC2基因的克隆及其在镉胁迫下的表达分析》

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以转录组测序数据中NAC转录因子编码基因ID号（LOC102585728），在NCBI中找到基因全长及ORF序列，使用Primer 5.0设计能扩增出基因ORF的特异性引物、荧光定量引物及Actin内参基因引物（表1）。以马铃薯c DNA为模板进行PCR扩增使用25μL PCR反应体系：c DNA 1μL；引物各1μL；2×Trans Taq PCR Super MixⅡ12.5μL；dd H2O 9.5μL。PCR反应程序为：94℃预变性3 min；94℃变性30 s，50℃退火30 s，72℃延伸1.5 min，35个循环，最后72℃终延伸5 min，4℃保存。1%的琼脂糖凝胶电泳检测，回收目的条带，将PCR产物连接克隆载体p MD19-Tvector，转化大肠杆菌大肠杆菌（E.coil） DH5α感受态细胞，PCR菌液鉴定后挑取阳性克隆送至生工生物（上海）有限公司测序。