《表1 实验中所用到的引物》

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《浓缩生长因子对缺血再灌注诱导的小鼠骨样细胞凋亡的作用研究》

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（1）准备引物:将引物稀释为工作液（10μM）；实验中所用到的引物包括:见表1。（2）打开Realtime-PCR仪，设置反应条件:反应温度为:95℃5min，95℃15s，60℃45s（45个循环）；熔解曲线:55℃，95℃（每个循环增加0.5℃，81个循环）。（3）每个反应体系按以下混匀:1μL c DNA+1μL靶基因/内参的上游引物+1μL靶基因/内参的下游引物+10μL SYBR Green PCR master mix（2×）+7μL dd H2O。（4）将八联排放入PCR仪中，填写板子的布局。（5）点击“run”之后确认方法正确，再次点击“run”，弹出“保存”对话框，保存文件。（6）结束之后，导出数据，分析。（7）结果分析:靶基因相对mRNA水平=2（CT内参-CT靶基因）。