《表2 细胞壁扩展酶基因荧光定量引物设计》

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《甜瓜质地差异及相关细胞壁酶活性变化》


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[注]18S rRNA的引物序列引用自胡宝刚[20]。

采用TaKaRa多糖多酚试剂盒提取果肉总RNA(有改进),所提取的总RNA于UV-1700紫外分光光度计测定A260、A280、A230,1%琼脂糖凝胶电泳,检测RNA质量和完整性。采用Primer 5.0软件进行qRT-PCR引物设计,引物序列如表2。使用Ta KaRa逆转录试剂盒进行cDNA第一链的合成,RNA模板量为1 000 ng。PCR反应总体积10.0μL,其中包括2.0μL模板(cDNA),0.2μL特异引物,5.0μL SYBR?Premix Ex TaqTM(2×),2.6μL ddH2O补齐。PCR程序为,94℃3 min,94℃10 s,60℃30 s,40个循环,每个样品设置3次重复,引物序列如表2。