《表1 CsDHAR克隆与表达分析所用引物》

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《茶树DHAR酶基因的克隆与非生物胁迫响应分析》


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根据本课题组茶树转录组数据(Wu et al.,2014)设计1对特异性引物Cs DHAR-QF和Cs DHAR-QR(表1)。PCR扩增体系为20μL,包括1μL模板、7μL dd H2O、10μL 2×Taq Plus Master Mix酶、Cs DHAR-QF/QR引物各1μL。PCR程序条件为:95℃预变性5 min;同温度变性30 s,55℃复性30s,72℃延伸60 s,进行35个循环后72℃延伸10 min。经琼脂糖凝胶电泳分离,回收PCR产物连接到p MD19-T载体,之后转入大肠杆菌感受态细胞,提取质粒送至金斯瑞生物科技有限公司进行测序。