《表1 定量PCR的引物序列》

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《不同利用方式红壤反硝化势和气态产物排放特征》

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注：加粗字母表示简并碱基的位置。

土壤DNA的提取及反硝化功能基因丰度的检测参照Yu等[12]的方法：称取0.5 g置于-80℃冰箱中保存的供试土壤，用FastDNA SPIN DNA提取试剂盒（MP Biomedicals），按说明书上的步骤进行土壤总DNA的提取。用于定量反硝化功能基因nirK，nirS，nosZ的引物，如表1所示。定量PCR的扩增条件为95℃预变性2 min，95℃变性10 s，58℃退火20 s，72℃延伸20 s，循环40次。每个样品设置3个测量重复，阴性对照以ddH2O代替模板DNA。扩增产生的溶解曲线和琼脂糖凝胶电泳分析用于检测扩增反应的特异性。