《表1 实时定量PCR的引物序列》

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《背角无齿蚌AwPrx4A基因克隆及在PFOS和PFOA胁迫下的表达分析》

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为了确定Aw Prx4A转录水平，采用SYBR Premix Ex TaqTM试剂盒（宝生物工程有限公司）按照要求进行定量分析。根据Aw Prx4A F和Aw Prx4A R引物序列，使用普通PCR仪分离靶基因（表1），扩增Aw Prx4A基因片段长度为180 bp，琼脂糖凝胶电泳仅在检测出的一个条带上进行PCR产物测序和序列鉴别。β-actin作为内参基因，使用ABI7500实时检测系统（Applied Biosystems，美国）进行real-time PCR测定；反应条件为:95℃、30 s，1个循环；95℃、5 s，60℃、34 s，40个循环；扩增效率为96.84%；构建标准曲线，通过2-△△CT分析Aw Prx4A表达水平。