《表1 用于荧光定量PCR的引物序列》

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《牙鲆fmr1基因的分子特征与表达分析》

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根据牙鲆fmr1 cDNA序列（XM＿020082509.1）设计定量引物（表1），在CFX96 Touch TM Real Time PCR Detection System（Bio-Rad）荧光仪上进行定量PCR检测。首先进行fmr1和内参18s标准曲线的制备，PCR反应体系包括5倍梯度稀释的c DNA 1μL、上下游定量引物各0.4μL以及Premix Ex TaqTMⅡ（TaKaRa）10μL，采用的反应程序为95℃10 min，95℃10 s和60℃30 s，40个循环。标准曲线的R值大于0.99，扩增效率（E）值于95%～110%范围之内。然后进行所有样品的定量检测，反应体系和程序同上，且实验设3次重复。