《表2 用于定量PCR的引物序列》

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《藻蓝色素蛋白诱导非小细胞肺癌H1299细胞凋亡的机制》

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TRIZOL法提取转染TIRAP si R-NA，Neg.si RNA的H1299细胞的总RNA，在超净台中吹干RNA，加入适量DEPC水溶解，反复吹打混匀，使RNA充分溶解。根据浓度计算2μg质量的RNA体积，作为反转录c DNA的模板，反转录体系为20μL，加入5×g DNA Buffer 2μL，再用DEPC水补齐到10μL，简短离心，放置42℃，孵育3 min，加入下一步的Mix。Mix体系为10×Fast RT Buffer 2μL，RT Enzyme Mix 1μL，FQ-RT Primer Mix 2μL，RNase-Free dd H2O 5μL，42℃孵育15 min，95℃孵育3 min，4℃保存。剩余RNA可放于-80℃冰箱保存。q RT-PCR反应体系为20μL，程序设置采用3步法，设计引物序列如表2(GAPDH为内参基因）。