《表2 实时荧光PCR扩增结果》

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《烘焙食品中转基因成分定性检测的FAPAS能力验证结果与分析》

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注:1:R1和R2为2次重复；2:*为两次上机检测结果的平均值；3:—表示未检出。

按照行业标准SN/T 1204-2016和作业指导书要求，对该样品进行了pCaMV35S和tNOS基因的检测，检测结果见表2，荧光PCR扩增曲线见图1～6。由结果可知，该批样品2个重复的内源基因值均小于30，且扩增曲线为典型的S型，说明提取的DNA浓度满足标准对内源基因的要求。pCaMV35S基因和tNOS基因为强阳性，平均Ct值分别为32.86和30.04，按照理想状态下，即扩增效率为100%时，Ct值相差3.3，含量相差10倍估算[12]，pCaMV35S和tNOS含量约为10%和100%；GTS40-3-2平均Ct值在34.05，含量估算在1%左右；MON863品系第一次检测Ct值分别为36.94和35.68（平均值为36.31），按照标准中“测试样品的Ct值在36～40之间，应调整模板浓度，重做实时荧光PCR。再次扩增后的外源基因Ct值仍小于40，则可判定为该样品含有所检基因或品系”要求，本实验重新调整模板浓度后上机检测，再次检测Ct值分别为36.90和36.86（平均值为36.88），因此判定该样品检出MON863品系。其余品系未检出（检测图谱未提供）。pCaMV35S和tNOS基因在Vii7荧光PCR仪进行检测，其余品系均在7900荧光PCR仪进行检测。