《表1 用于PCR的引物序列》

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《植物乳杆菌对大肠杆菌感染猪肠道上皮细胞形态、存活和免疫应答的影响》

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F:上游forw ard；R:下游reverse。

按Trizol法提取细胞总RNA，接着按照Quant c DNA第1链合成试剂盒说明书将其逆转录成c DNA。以c DNA为模板，按照普通PCR试剂盒说明书进行扩增，摸索试验目的基因反应体系及程序，产物用琼脂糖凝胶电泳鉴定。用于PCR的引物序列见表1。将普通PCR摸好反应体系及程序的目的基因按照SuperReal荧光定量预混试剂说明书进行实时定量荧光（real-time）PCR，用于检测Toll样模式识别受体（Toll-like receptors，TLRs）中Toll样模式识别受体2（TLR2）、Toll样模式识别受体6（TLR6）和NOD样模式识别受体（NOD-lik receptors，NLRs）中NOD样模式识别受体1（NOD1）、NOD样模式识别受体2（NOD2）以及细胞因子[白细胞介素-8（IL-8）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）]的mRNA相对表达量。