《表1 用于qRT-PCR的引物序列》

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《杨树重金属相关异戊二烯化植物蛋白(HIPPs)基因的鉴定及表达分析》

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利用pBIOZOL植物总RNA提取试剂盒（杭州BioFlux）提取试材总RNA。去除基因组DNA后，使用PrimeScriptTMRT reagent Kit（TaKaRa）进行反转录合成cDNA第一条链。根据PtHIPPs基因序列设计定量引物，以毛果杨PtUBQ7（XM＿002306689.2）和PtCDC2（XM＿002305968.2）基因作为内参基因（表1）[21]。按照康为世纪的UltraSYBR Mixture（LowROX）试剂盒中20μL反应体系的说明加样，在ABI 7500荧光定量PCR仪上进行Real-time PCR反应。每个样品重复3次，采用2-ΔΔCT法进行基因的相对定量分析[24～25]，鉴定小黑杨PnHIPPs基因应答铜胁迫处理的表达模式及PnHIPPs基因的组织表达特异性。