《表1 荧光定量PCR引物序列》

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《松针多糖对鸡巨噬细胞HD11的天然免疫调节》

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以GAPDH为内参，应用软件Primer5.0设计引物，由上海华大基因公司合成。引物序列详见表1。收集1.2.4细胞因子检测的细胞，采用Trizol裂解法提取细胞总RNA，反转录合成cDNA，按照试剂盒说明，利用荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测iNOS mRNA的表达水平。qRT-PCR反应程序：95℃预变性3 min；95℃变性3s，60℃退火30s，45个循环。将细胞送到上海生工生物有限责任公司检测iNOS mRNA的表达。Real-time PCR结果采用2-ΔΔCT方法获得目的基因的相对表达量，ΔΔCT=(CT目的基因-CT管家基因）试验组-（CT目的基因-CT管家基因）对照组，CT就是光吸收值达到域值（Threshold）所需的循环数（Cycle）[8]。