《表1 荧光定量PCR引物序列》

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《硫酸脱氢表雄酮抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的分子机制研究》

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分别于诱导前、诱导后第1，2，4，6，10，14天收集细胞，总RNA提取采用Trizol法，参考Trizol说明书操作提取总RNA。紫外分光光度仪测定OD260 nm/OD280 nm比值和总RNA浓度，取1μg总RNA，逆转录为cDNA（20μl体系），-20℃保存。逆转录条件为:37℃15 min；85℃5 s；4℃维持。以β-actin为内参，用real time-PCR法观察目的基因:PPARγ、ADD1/SREBP1-c、C/EBP-α、C/EBP-β、C/EBP-δ、11HSDB1、LPL和HSL mRNA表达的变化。PCR扩增条件:95℃10 min；95℃15 s，60℃1 min，共40个循环。PCR扩增引物序列见表1。